现行致泻大肠埃希氏菌的检验方法是GB 4789.6-2016 《食品安全国家标准 食品微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验》。根据标准要求,在做PCR确认实验时,“每次PCR反应使用EPEC、EIEC、ETEC、STEC/EHEC、EAEC标准菌株作为阳性对照。同时,使用大肠埃希氏菌ATCC 25922或等效标准菌株作为阴性对照”。
CICC整理了7株标准菌株的典型特征照片和描述,供检测实验室参考。
形态学
左:麦康凯(MAC)琼脂培养基,36 ℃培养24 h,菌落砖红色至桃红色,圆形,表面光滑,菌落周围培养基呈粉红色。
右:伊红美蓝(EMB)琼脂培养基,36 ℃培养24 h,菌落紫黑色,带或不带金属光泽,圆形,表面光滑,边缘整齐。
关键生理生化
三糖铁实验:
a. 空白对照
b. 斜面产酸变黄,底层产酸变黄,不产硫化氢,产气。
特征基因
7株大肠埃希氏菌毒力基因电泳检测结果
注:电泳图中相关标记释义:M, DL2000 Marker; 1, uidA; 2, aggR; 3, astA; 4, pic; 5, bfpB; 6, escV; 7, stx1; 8, stx2; 9, lt; 10, stp; 11, sth; 12, invE.
7株大肠埃希氏菌特征性基因序列分析