2023年2月10日，食品安全国家标准审评委员会秘书处就《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数》等38项食品安全国家标准和修改单（征求意见稿），截止日期为2023年3月20日。

一、主要变化

1.删除了术语和定义； 

2.增加了检验原理； 

3.修改了设备和材料、培养基和试剂； 

4.修改了检验程序、操作步骤和附录。 

二、详细内容比对

1. 修改了标准的范围描述

征求意见稿中第一法、第二法的适用范围分开描述，处理过程明确、清晰。

2. 删除了术语和定义

3. 修改了部分设备和材料

a、增加44.5 ℃±0.2 ℃恒温装置，对于冰箱的设备参数进行微调。

b、增加了易耗品无菌试管、接种环、吸管及均质袋和均质杯的材料要求。

c、删除了菌落计数器、紫外灯等设备的要求。

4. 修改了部分培养基和试剂

a.删除了蛋白胨水、缓冲葡萄糖蛋白胨水[甲基红(MR)和 V-P 试验用]、西蒙氏柠檬酸盐培养基、伊红美蓝（EMB）琼脂、营养琼脂斜面、结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）、结晶紫中性红胆盐-4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷琼脂（VRBA-MUG）、 革兰氏染色液、Kovacs 靛基质试剂等培养基。

b、由于现行标准 ISO 16649-2:2001及ISO 16649-3：2015 均采用 TBX 琼脂对食品、动物饲料中大肠埃希氏菌进行平板计数。将样品稀释液接种于多管选择性肉汤中，对于发酵乳糖产酸者，划线接种于 TBX 琼脂平板，有蓝色或蓝绿色 菌落判断为阳性，因此征求意见稿中也用 胰蛋白胨胆盐 X-葡萄糖醛酸苷（Tryptone Bile X-glucuronide，TBX）琼脂进行确认实验。

5. 修改了第一法检验程序

a、征求意见稿检验程序中删除了12版中的伊红美蓝平板分离培养、营养琼脂斜面或平板培养、然后进行靛基质试验、MR-VP 试验和柠檬酸盐利用试验的过程，直接用TBX 琼脂平板进行验证实验，流程更简洁。

b、检验程序“接种EC肉汤”后的培养时间由原来的“48h±2h”修改为“24~48h”。

6. 修改了第一法操作步骤

1）样品稀释

a、稀释液增加“生理盐水”，让操作者有更多的选择。

b、样品稀释过程中删除了换用1mL无菌吸管反复吹打的操作文字描述。

c、修改并增加了液态样品制备的操作部分，更详细。

2）初发酵、复发酵试验过程变化不大，进行细微的调整。

3）确认实验直接用TBX琼脂进行，减少了繁琐的生化鉴定过程，实验操作更方便、快捷。

7. 修改了第二法中操作步骤中的部分描述

a、征求意见稿中也是进行了培养基的调整，描述也进行了相应的调整。

b、征求意见稿中新增了大肠埃希氏菌菌落数的计算。

8. 完善了结果报告

结果报告在2012版的基础上进行了细化，菌落生长大于和小于100的情况分别给出了相关要求描述。

9. 修改了部分附录

a、征求意见稿中 附录 A 培养基和试剂也是进行了相应的调整，并增加了附录C 贝类产品中大肠埃希氏菌最可能数（MPN）检索表 。

征求意见稿征求意见链接：

https://sppt.cfsa.net.cn:8086/cfsa_aiguo