微生物菌种化学组分特征是微生物菌株的关键特征，在微生物鉴定学中具有重要的分类学意义。为帮助大家更好地理解和应用新种化学组分分析的各种技术，CICC推出“微生物菌种化学组分分析”专题，系统介绍极性脂、呼吸醌、细胞壁糖与DAP、脂肪酸4种分析手段的原理、方法和实验结果解读。

微生物菌种化学组分分析 专题目录

第一期：极性脂组分分析

第二期：呼吸醌组分分析

第三期：细胞壁糖与DAP组分分析

第四期：脂肪酸组分分析

第一期让我们一起了解 极性脂组分分析

极性脂主要包括由不同的磷酸盐、糖与脂肪酸酯化的磷脂和糖脂，与蛋白质和糖等物质共同构成细胞膜，对细胞的物质运输、代谢以及维持正常渗透压具有重要作用。其中磷酸类脂组分在不同属菌间存在差异，因此对微生物的化学分类具有重要意义，是鉴别菌属的关键特征之一。

具有分类学意义的磷酸类脂及其化学结构

磷脂酰乙醇胺

phosphatidyl ethanolamine, PE

磷脂酰甘油

phosphatidyl glycerol, PG

双磷脂酰甘油

diphosphatidyl glycerol, DPG

磷脂酰甲基乙醇胺

phosphatidylmethyl ethanolamine, PME

磷脂酰胆碱

phosphatidyl choline, PC

含葡萄糖胺未知结构的磷酸类脂

phospholipid of unknown structure containing glucosamine, GluNu

极性脂提取与显色“三部曲”

极性脂提取与显色的三个关键步骤是：样品前处理、极性脂提取与浓缩、展层与显色。

1.样品培养与前处理

菌株活化后转接至液体培养基，离心获得新鲜培养物沉淀，沉淀冻干为菌粉备用。

2.极性脂提取与浓缩

冻干菌粉中加入甲醇、氯仿与玻璃珠振荡破碎，离心取清液，加入无菌去离子水和氯仿，混合均匀后取下层有机相，利用旋转蒸发仪与真空浓缩仪进行两次浓缩。

3.展层与显色

样品点在TLC板上进行双向展层，晾干显色。

极性脂的判定方法

CICC根据多年检测经验建立出一组主要极性脂标准图谱。

根据待测样品在不同显色剂下显色结果及迁移率，通过与极性脂的标准图谱进行比对，确定待测样品的主要极性脂类型。

CICC极性脂组分分析科研成果

依托极性脂组分分析等技术，中心长期协助企业开展微生物资源开发工作，分析生产环境微生物群落结构，研究具有典型特征的微生物菌株，如：芝麻香型酒大曲中分离得到的Thermoactinomyces daqus CICC 10681 [1]、日化企业肥皂缸中分离得到的Halomonas alkalicola CICC 11012s [2]，以及在浓香型白酒生产过程中分离得到的Bacillus aquiflavi CICC 24755 [3]等，为企业工业生产中的微生物安全控制和菌种资源开发提供有力支持。

编辑搜图

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Halomonas alkalicola CICC 11012s

极性脂组分分析结果

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Bacillus aquiflavi CICC 24755

极性脂组分分析结果

参考文献

[1] Yao S, Liu Y, Zhang MJ, et al. Thermoactinomyces daqus sp. nov., a thermophilic bacterium isolated from high-temperature Daqu[J]. International journal of systematic and evolutionary microbiology, 2014, 64(Pt_1): 206-210.

[2] Tang X, Zhai L, Lin YF, et al. Halomonas alkalicola sp. nov., isolated from a household product plant[J]. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2017, 67(5): 1546-1550.

[3] Xie J, Cheng K, Zhao D, et al. Bacillus aquiflavi sp. nov., isolated from yellow water of strongly flavored Chinese baijiu[J]. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2020, 70(5): 3406-3412.

中国工业微生物菌种保藏管理中心（CICC）是中国唯一的国家级工业微生物菌种保藏管理中心，能够提供多菌种化学组分分析检测，包括极性脂检测、脂肪酸检测、细胞壁组分检测、醌组分检测，检测方法均已通过ISO 17025与CMA检测实验室能力认可，可为您提供专业、高效的微生物菌种化学组分分析服务。